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濕熱滅菌法

更新時間:2014-04-02   點擊次數:5285次

濕熱滅菌法指將物品置于滅菌柜內利用高壓飽和蒸汽、過熱水噴淋等手段使微生物菌體中的蛋 白質、核酸發生變性而殺滅微生物的方法。該法滅菌能力強,為熱力滅菌中zui有效、應用zui廣泛的滅菌方法。藥品、容器、培養基、無菌衣、膠塞以及其他遇高溫和潮濕不發生變化或損壞的物品,均可用本法滅菌。流通蒸汽不能*殺滅細菌孢子,一般可作為不耐熱無菌產品的輔助滅菌手段。

常用的滅菌方法有濕熱滅菌法、干熱滅菌法、氣體滅菌法、輻射滅菌法和過濾除菌法。可根據被滅菌物品的特性采用一種或多種方法組合滅菌。只要產品允許,應盡可能選用zui終滅菌法(即產品分裝至包裝容器后再滅菌)滅菌。若產品不適合采用zui終滅菌法,可選用過濾除菌法或無菌生產工藝達到無菌保證要求,只要可能,應對非zui終滅菌的產品作補充性滅菌處理(如流通蒸汽滅菌)。 
(一)濕熱滅菌法 
指將物品置于滅菌柜內利用高壓飽和蒸汽、過熱水噴淋等手段使微生物菌體中的蛋 白質、核酸發生變性而殺滅微生物的方法。該法滅菌能力強,為熱力滅菌中zui有效、應用zui廣泛的滅菌方法。藥品、容器、培養基、無菌衣、膠塞以及其他遇高溫和潮濕不發生變化或損壞的物品,均可用本法滅菌。流通蒸汽不能*殺滅細菌孢子,一般可作為不耐熱無菌產品的輔助滅菌手段。


    濕熱滅菌條件通常采用121*15min121*15min116*40min的程序,也可采用其他溫度和時間參數??傊仨毐WC對熱穩定的物品,可采用過度殺滅法,其SAL<=10(-12)。熱穩定性較差產品的標準滅菌時間F。[指當滅菌溫度為121,生物指示菌的耐熱參數D值為1min,滅菌溫度系數Z值為10.0時的標準滅菌時間(121下計算的微生物等效滅活率)]一般不低于8min,如產品的熱穩定性很差時,可允許濕熱滅菌的F。低于8min,此情況下,應在生產全過程中,對產品中污染的微生物嚴加監控,并采取各種措施降低微生物污染水平,確保被滅菌產品達到無菌保證要求。 
    
采用濕熱滅菌時,被滅菌物品應有適當的包裝和裝載方式,不能排列過密,以保證滅菌的有效性和均一性。 
    
濕熱滅菌工藝驗證時,應進行熱分布試驗、熱穿透試驗和生物指示劑驗證試驗。以確定滅菌柜空載及不同裝載時腔室中的熱分布狀況及可能存在的冷點;在空載條件下,確認121時腔室各點的溫度差值應<1;使用插入實際物品或模擬物品內的溫度探頭,確認滅菌柜在不同裝載時,zui冷點物品的標準滅菌時間(F。)達到設定的標準;用生物指示劑進一步確認在不同裝載時冷點處的滅菌物品達到無菌保證水平。本法常用的生物指示劑為嗜熱脂肪芽孢桿菌孢子。 
影響濕熱滅菌的主要因素有:微生物的種類與數量、蒸汽的性質、藥品性質和滅菌時間等。
1流通蒸氣滅菌法:是指在常壓條件下,采用100攝氏度流通蒸氣加熱殺滅微生物的方法,滅菌時間通常為30-60分鐘。該法適用于消毒以及不耐高熱制劑的滅菌,但不能保證殺滅所有芽孢,是非可靠的滅菌方法。
2間歇蒸汽滅菌法:利用反復多次的流通蒸汽加熱,殺滅所有微生物,包括芽胞。方法同流通蒸汽滅菌法,但要重復3次以上,每次間歇是將要滅菌的物體放到37孵箱隔夜,目的是使芽胞發育成繁殖體。若被滅菌物不耐100高溫,可將溫度降至7580,加熱延長為3060分鐘,并增加次數。適用于不耐高熱的含糖或牛奶的培養基。
3高壓蒸汽滅菌法:103.4千帕蒸汽壓溫度達121.3,維持15-20分鐘。
濕熱法可在較低的溫度下達到與干熱法相同的滅菌效果,因為:濕熱中蛋白吸收水份,更易凝固變性;水分子的穿透力比空氣大,更易均勻傳遞熱能;蒸汽有潛熱存在,每1克水由氣態變成液態可釋放出529卡熱能,可迅速提高物體的溫度。
一般采用121,滅菌20-30min,如果是產孢子的微生物則應采用滅菌后適宜溫度下培養幾小時,再滅菌一次,以用于殺死剛剛萌發的孢子。




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